Флуоресцентный белок из мышц японского угря, используемый для обнаружения билирубина у новорожденных

Исследовательская группа, возглавляемая профессором проекта Мориока Ичиро (Высшая школа медицины Университета Кобе, кафедра педиатрии) и доцентом Иватани Сота (Больница Университета Кобе, Центр перинатальной помощи) в сотрудничестве с доктором Мияваки Ацуши (руководитель группы в Институте науки о мозге) , RIKEN) клинически доказали, что флуоресцентный белок, полученный из мышц японского угря, можно использовать для точного определения неконъюгированного билирубина у новорожденных. Этот метод обнаружения идеально подходит для новорожденных, которые могут сдавать только ограниченные образцы крови, и может революционизировать способы мониторинга желтухи у новорожденных. Результаты были опубликованы 21 июня 2016 г. в онлайн-издании Scientific Reports.

Уровень смертности новорожденных в Японии самый низкий в мире – 0.9 из 1000 родов благодаря достижениям в области медицинского управления и технологий в отделениях интенсивной терапии. С другой стороны, в Японии растет число случаев ядерной желтухи, вызванной нейротоксичностью билирубина, у недоношенных новорожденных, что может привести к неврологическим нарушениям, таким как церебральный паралич и потеря слуха. Существует острая потребность, особенно в Японии, в улучшении методов обнаружения билирубина у недоношенных детей.

Современные традиционные методы измерения билирубина в Японии не унифицированы. Кроме того, в текущих методах возникли противоречивые результаты, вызванные разными методами. Что наиболее важно, эти современные методы приводят к неточным результатам из-за влияния гемоглобина и липидов, которые часто включаются в клинические образцы сыворотки недоношенных или болезненных новорожденных. Педиатрам, особенно неонатологам, нужен был высокочувствительный метод, позволяющий измерять билирубин без влияния гемоглобина и липидов на основе небольших образцов крови.

Команда проекта профессора Мориока сосредоточилась на UnaG, флуоресцентном белке, взятом из мышц японских угрей, разработанном в 2013 году доктором. МИЯВАКИ Ацуши. Метод UnaG позволяет напрямую измерять концентрацию неконъюгированного билирубина в крови с чувствительностью, в 10 000 раз превышающей чувствительность современных традиционных методов. Команда провела обширные эксперименты, чтобы подтвердить точность измерения неконъюгированного билирубина с помощью метода UnaG и изучить, влияет ли на этот результат фототерапия, конъюгированная гипербилирубинемия, гемолиз или липиды.

После анализа 140 образцов сыворотки от 92 новорожденных (в том числе 35 образцов от младенцев, получавших фототерапию), команда зафиксировала высоко положительную корреляцию между результатами, измеренными с помощью билирубиноксидазы (текущий традиционный метод) и метода UnaG. Фототерапия не повлияла на данные. Они также подтвердили, что на результаты метода UnaG не влияет влияние конъюгированного билирубина, гемоглобина или липидов.

В этих экспериментах для измерения одного образца использовался всего один микролитр крови. Это инновационный способ измерения уровня билирубина у новорожденных пациентов, которые могут сдавать только ограниченные образцы крови. Измерение билирубина с помощью этого метода может помочь ограничить неврологические нарушения, вызванные токсичностью билирубина у недоношенных детей, такие как церебральный паралич и потеря слуха. Команда планирует разработать более простой набор для анализа, который можно будет использовать в клинической практике.